肉的宰后嫩化主要是归因于肌原玻璃食物纤维材料组成的被破坏，肌原玻璃食物纤维材料组成是由内源性蛋清溶解酶吸附肌原玻璃食物纤维材料和上皮受损肿瘤癌细胞核骨架蛋清导致的。与几十块年来直是点赞聚焦点的钙蛋清酶各不相同，胱天蛋清酶（caspases）最新变为感意向的话语题。胱天蛋清酶在上皮受损肿瘤癌细胞核凋亡的强制执行关键期起着至关根本的的意义，另外caspase-3在生前蛋清溶解中的的意义是多多面和更复杂的，以至于需要进一次论述。S-亚硝基化经过缓解钙放出、热量排泄、蛋清质吸附和上皮受损肿瘤癌细胞核凋亡来缓解肉肥，收录嫩度和持水工作能力。项目前期论述遇到S-亚硝基化不错下降依赖于线粒体的caspase-3级联反响，这有机会是腹肌上皮受损肿瘤癌细胞核凋亡和鸡肉茶叶品质变换的因素。caspase-3的论述重点村是其与上皮受损肿瘤癌细胞核凋亡的有关，其实，少许有论述刍议S-亚硝基化缓解caspase-3的长效机制。

2024年9月由北京现代农业社会张万刚教受创业团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱海洋生物为该研究提供了亚硝基化突显组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文版宝贝标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202历经四年影响力细胞因子：5.7

发过时间间隔：2024年9月

业主厂家：南京农业大学

实验用料：蛋白

拜谱提高新技术：亚硝基化修饰组学

技术水平规划：

一、理论研究但是

01.Caspase-3吸附性

现下尚不很清楚NO对caspase-3的限制作而成用什么情况下归因于NO介导的S-亚硝基化，有所差异密度均值的GSNO充当外源性NO提供，以诱惑caspase-3的体内S-亚硝基化。最后表达，与就没有GSNO的组对比，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力重要缩减（图1），与事先通讯报道相符。GSNO整理缩减caspase-3活力的隐藏的主观原因仍有待于具体分析。

图1 各不相同氧浓度的GSNO除理对caspase-3灵活性的关系

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化状态

设计Caspase-3的亚硝基化层次，以具体分析GSNO对Caspase-3的的反应性。经GSNO操作后，检验到caspase-3蛋白质S-亚硝基化构造加剧（图2）。这么多殊不知反映出，外源性GSNO的培养可获得成功帮助caspase-3的休外S-亚硝基化。最令惊艳的是，在并没有GSNO来源于的比对组中检验到一不大的S-亚硝基化带，这反映出caspase-3可能性产生内源性的S-亚硝基化。除此之外，本设计中caspase-3的S-亚硝基化层次较高，而caspase-3的特情人削减，这与以前的设计不符。殊不知，caspase-3的特情人S-亚硝基化体现位点尚不很清楚，还都要进几步的探险。

图2 GSNO加工处理对caspase-3S-亚硝基化横向的后果

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化淡化组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码字段。海蓝标示的编码字段数字代表S-亚硝基化肽，朱红色标示的C数字代表S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3降解塑料结蛋清

结球核淀粉酶质质质用作一种生活很重要性的細胞骨架球核淀粉酶质质质，在提升肌細胞设计的设计有效性性和拉伸性方位起至关很重要要性角色，探索S-亚硝基化caspase-3对结球核淀粉酶质质质溶解的明单纯兼备很重要性实际意义。与Std（未用胱天球核淀粉酶质质质酶-3和GSNO孵育的初期肌氯纶球核淀粉酶质质质）组不同于，0 μM GSNO组（肌原氯纶和caspase-3的孵育，无GSNO）的有效性结球核淀粉酶质质质占比同质性拉低，警告caspase-3对结球核淀粉酶质质质兼备未知的球核淀粉酶质质质淀粉酶质水解效果。在GSNO孵育后，有效性结球核淀粉酶质质质的占比特别增多（P < 0.05）。不仅如此，当GSNO浓度值偏高时，有效性结球核淀粉酶质质质的占比维持上浮（P < 0.05）（图5）。这一种察觉到表面，SNO呈现的caspase-3以关卡依懒的原则克制结球核淀粉酶质质质的溶解。

图5.S-亚硝基化caspase-3化学降解结核蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙球蛋白-T

肌钙蛋清-T (TnT)是原肌球蛋清上下调整提供身体肌肉缩水的细细的的须得肌原食物钎维蛋清。TnT的光分解特征英文是验测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化前提下，caspase-3对TnT的光分解环境右图6提示，与Std组（没含caspase-3和GSNO的肌原食物钎维）对比，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写强势上升，表示caspase-3参与性了TnT的光分解，虽然，caspase-3与GSNO的孵育引起30 kDa TnT回落。在100和200 μM GSNO组期间无验测到很大的一定的差异(P > 0.05)，而当GSNO的溶液浓度以达到400 μM 时，该细节描写强势减轻(P < 0.05)。这部分表示表示了SNO表达的caspase-3对TnT光分解的阻止功用。结蛋清和TnT是caspase-3的铭感底物，而GSNO处里消减caspase-3的生物酶能够引起肌原食物钎维蛋清光分解层次消减。上述讲到所写，NO帮助的S-亚硝基化还可以凭借表达半胱氨酸残基来上下调整caspase-3的生物酶，而能进1步危害其对结蛋清和TnT的蛋清蛋白质水解的能力，所以危害牛肉片品控。

图6. S-亚硝基化caspase- 3分解肌钙血清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本探究旨在通过讨论S-亚硝基化对caspase-3呈现的印象非常那么对羊肉片肌原化学食物纤维身体之外降解塑料的印象。血清S-亚硝基化行呈现caspase-3的半胱氨酸残基，最后从而导致caspase-3灵活性降低了，进1步抑制性了其对羊肉片肌原化学食物纤维血清的血清油脂水解力。

三、拜谱个人总结

研发主要包括了酶活测量，亚硝基化突显语组学剖析，WB等检查测量技术，发现了核血清酶S-亚硝基化能够 突显语caspase-3的半胱氨酸残基，这形成了caspase-3活力性的减小，相结一大步自我调节了其对鸡肉肌原植物纤维核血清酶的核血清酶油脂水解本事。本研发为表述核血清酶质亚硝基化对口感的自我调节长效机制作为了个新的视距。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、遮盖蛋清质组学、分解组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸编食品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total空气氧化保存、解离巯基，欢迎大家咨询！

参阅医学文献：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663